在蛋白純化實驗的過程中,保證蛋白樣品的純度和質量是關鍵,為了促進蛋白的可溶性,會使用不同的標簽,除了常用的His標簽,GST標簽也是純化實驗中的明星標簽。
關于GST標簽蛋白及純化
GST標簽是一種親和標簽,能特異的與谷胱甘肽結合,表現為酶和底物的作用原理,利用這個原理將GST做成標簽表達出融合蛋白,與帶谷胱甘肽的親和介質特異性結合純化出目的蛋白,再用特異性的酶將GST標簽切除,從而得到天然蛋白。
GST融合蛋白純化具有純度高、純化條件溫和、蛋白活性不受影響以及促進蛋白的可溶性表達等優勢。因此,在蛋白研究中,想獲得高可溶性蛋白,可優先考慮GST融合表達系統。
GST標簽蛋白純化方案
無論是大腸桿菌或者其他宿主細胞中,天然表達的還是重組表達的,各種來源的GST標簽蛋白,都可以用固定的谷胱甘肽親和層析法純化,然后用過量的還原性谷胱甘肽競爭洗脫。使用以瓊脂糖凝膠為基質的 GST Chromrose 4FF 介質,可以在相對較高流速的情況下,實現對目的蛋白的純化。此介質通過標簽與配體結合,緩沖液洗脫去除雜質,然后標簽蛋白在溫和且非變性的條件下被洗脫,使得蛋白的抗原性能和功能得以保護。
產品測試
層析介質:GST Chromrose 4FF
樣 品:帶 GST 標簽的某融合蛋白
實驗設備:5mL Xtrap GST 4FF 預裝柱、蛋白純化儀
平衡液/洗雜液:140mM NaCl,2.7mM KCl,10mM Na2HPO4,1.8mM KH2PO4,pH 7.4
洗脫液:140mM NaCl,2.7mM KCl,10mM Na2HPO4,1.8mM KH2PO4,10mM還原型谷胱甘肽,pH 7.4 (現配現用)
說明:
? 1、3、4、5 是其他公司 GST 標簽蛋白純化填料
? 2 是科諾賽生物的 GST Chromrose?4FF
從測試結果看, 在相同的實驗條件下,科諾賽生物的 GST Chromrose 4FF 產品載量表現較為突出。
產品介紹
GST Chromrose 4FF 是以高度交聯的瓊脂糖凝膠為基質的親和層析介質,操作條件溫和、特性性強,可以一步純化各種表達系統表達的谷胱甘膚-S -轉移酶、谷胱甘依賴性蛋白和谷胱甘膚轉移酶的重組衍生物。
電 話:0532-55679191(工作時間8:30-17:30)
郵 箱:marketing@chromsep.cn
研發中心:山東青島市高新區錦匯路1號藍灣創業園A3棟6層
生產基地:山東日照市經濟技術開發區深圳路廈門路001號
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